透射及扫描电镜演示实验

八戒

一、实验目的：
1、了解透射电镜、扫描电镜各部件的名称、结构及性能；
2、了解透射及扫描电镜的基本操作程序；
3、了解电镜样品制备的配套设备。
二、实验仪器及用品：
透射电镜；扫描电镜；小白鼠肝脏超薄切片；酵母菌或乳酸杆菌的负染样品；喷好金膜的叶片及花粉样品
三、方法步骤：
（一）透射电镜操作规程：
1、本仪器的操作者必须熟悉仪器的全部操作规程，通过操作考试后才能正式上机操作。
2、操作程序
1）开机准备
（1）    合上总电源闸刀，开启电子交流稳压器，电压指示应为220V。开启循环水，温度指示应为15-20℃。
（2）    开启主机真空开关。
（3）    约20分钟后，待高真空指示灯及照相室指示灯亮。
2）工作程序
（1）开启主机电源开关，待荧光屏显示操作数据后再进行下一步。
（2）逐级加高压致所需电压，每加一级高压，必须等高压表中指示针停止摆动才能加下一级。如指示针移出量程，必须从最低移级加起。
（4）    根据说明书要求进行合轴操作，使仪器处于最佳操作状态。
（4）根据说明书的操作要求进行观察、换样和拍照。
（5）作好实验记录及仪器使用记录。
3）关机程序
（1）关灯丝电流。
（2）关高压。
（3）关主机电源开关。
（4）关真空开关。
（5）    20分钟后，关循环水和电子交流稳压器开关。
（6）    关闭总电源。
（二）扫描电镜操作规程：
1、本仪器的操作者必须熟悉仪器的全部操作规程，通过操作考试后才能正式上机操作。
2、操作程序
1）开机准备
（1）合上总电源闸刀，开启电子交流稳压器，电压指示应为220V。开启冷却循环水装置电源开关。
（2）开启试样室真空开关（VACUUM POWER），开启试样室准备状态开头（STAND BY）。
（3）开启控制柜电源开关（POWER）.
（4）约20分钟后，往试样室液氮冷井中加入液氮。
2）工作程序
（1）开启试样室进气阀控制开关（CHAMB VENT），将试样放入试样室后将试样室进气阀控制开关（CHAMB VENT）关闭抽真空。
（2）开启镜筒真空隔阀。
（3）加高压（ACCELERATION POTENTIAL）至25KV.
（4）加灯丝电流（FILAMENT）至7.5-8.
（5）调节显示器对比度（CONTRAST）、亮度（BRIGHTNESS）至适当位置.
（6）将图象选区开关拨至全屏（FULL）.
（7）调节聚焦旋钮（MEDIUM）和(FINE)至图象清晰。
（8）选择适当的扫描速率（SCAN RATE）观察图象。
（9）根据说明书的操作要求进行观察和拍照。
（10）作好实验记录及仪器使用记录。
3）关机程序
（1）关灯丝电流（FILAMENT）。
（2）关高压（ACCELERATION POTENTIAL）。
（3）反时针调节显示器对比度（CONTRAST）、亮度（BRIGHTNESS）到底.
（4）关闭镜筒真空隔阀。
（5）关主机电源开关。
（6）关真空开关。
（7）20分钟后，关循环水和电子交流稳压器开关。
（8）关闭总电源。
四、观察结果：
1、小白鼠肝脏超薄切片：一般可见细胞膜、核膜、内质网、线粒体、肌纤维等结构。
2、酵母菌或乳酸杆菌的负染样品：由于重金属盐在样品周围的堆积而使样品显示负的反差，从而衬托出样品的形态和大小。酵母菌近球型，有时可见出芽生殖；乳酸杆菌为杆状。
3、叶片在扫描电镜下一般可见上表皮有各种纹饰，下表皮可见气孔器形态
4、花粉在扫描电镜下一般可见表面的萌发沟和纹饰。
观察过程中寻找典型部位进行拍照。